TOSOH公司是世界上专门从事色谱层析产品的供应商之一,所生产的色谱柱和填料广泛应用于制药和生物产业当中. 其最著名的产品TSK-GEL色谱柱及其TOYOPEARL填料,已经在世界范围内非常多的实验室和工厂使用,非常适合蛋白,肽类,DNA, 寡聚糖,抗生素和其它小分子量的化合物的分析,分离和纯化的研究.
TSK-GEL SW系列色谱柱的填料是以刚性的球形硅胶为基质,在其表面通过共价键化学键合亲水团而成。TSK-GEL SW系列色谱柱的填料具有高性能尺寸排阻色谱所必需的性能,即低吸附性和良好的孔径分布;其pH适合范围为2.5-7.5,可以使用与水完全互溶的有机溶剂,如乙腈、丙酮、甲醇或乙醇等。TSK-GEL SW系列色谱柱适合用于分析分离蛋白质和多肽类样品,其他应用有大量文献报道。最经常使用的是10μm的TSK gel G2000SW,TSKgel G3000SW和13μm的TSKgel 4000SW色谱柱;TSK-Gel 2000SWXL和3000SWXL是5μm,TSK-Gel 4000 SWXL是8μm的高效填料色谱柱;分析型色谱柱的结构可以是玻璃或不锈钢材质。
TSK-GEL PW系列凝胶色谱柱的填料是亲水而刚性,多孔球型,化学和机械性能都非常优异的聚合物。适用于以凝胶色谱的模式分析分离蛋白质、多肽、多糖、寡糖、DNA、RNA、水溶性的有机聚合物和其他水溶性大分子样品等。TSK-GEL PW系列色谱柱的pH适用范围为2-12.可使用含有50%的混合有机溶剂为流动相,使用温度可达80℃(TSK-gel G-DNA-PW 为50℃)。尽管大多数的TSK-GEL PW填料呈微弱的负电性(约5~8μeq/ml),但是对于分析分离非离子、阴离子和大多数的阳离子型样品没有任何影响。因为TSK-GEL PW填料具有非常宽的分离范围,更加线性的校正曲线以及比TSK-GEL SW色谱柱更加低得多的吸附特性,所以TSK-GEL PW色谱柱经常用于分离水溶性的合成聚合物。
相对而言,TSK-GEL SW色谱柱适合于分析分离单分数性的生物大分子,如蛋白等。而TSK-GEL PW色谱柱则更加适合于如多糖和合成聚合物等多分散性样品的分析分离。
TSK-GEL PW有七种不同孔径的填料,通常分析色谱柱使用的填料粒度是10和 17μm,制备柱用的是17μm,22μm或25μm。TSK-GEL PWXL系列色谱柱所使用的填料是具有更高柱效的6μm,10μm或13μm的填料;混合床层的TSKgel GMPW和TSK-GEL PWXL系列色谱柱用于分离宽分子量范围,TSKgel G-Oligo-PW和TSKgel G-DNA-PW系列色谱柱则是分离寡糖和DNA或RNA的专用柱。
TSK-GEL SW 系列部分色谱柱填料的种类及分离范围
品牌
粒度(um)
孔径(Å)
样品分子量
球蛋白
葡聚糖
聚乙二醇
G2000SWxL
5
125
5,000~150,000
1,000~30,000
500~15,000
G2000SW
10
125
5,000~100,000
1,000~30,000
500~15,000
G3000SWxL
5
250
10,000~500,000
2,000~70,000
1,000~35,000
G3000SW
10
250
10,000~500,000
2,000~70,000
1,000~35,000
G4000SWxL
8
450
20,000~10,000,000
4,000~500,000
2,000~250,000
G4000SW
17
450
20,000~7,000,000
4,000~500,000
2,000~250,000
TSK凝胶色谱柱 使用指导
一.安装说明
1. 流向
安装使用时注意色谱柱上标明的流向箭头,安装反了会降低色谱柱柱效。
2. 去处气泡
从仪器上安装和拆卸色谱柱时一定要注意不要让气泡进入,安装时要去除管路中的气泡。
3. 安装
当进样端螺母拧下,有溶剂从接口溢出,可将色谱柱小心的与仪器连接,这样做可以保证没有气泡进入柱子。如果没有溶剂从接口处流出,将柱子反接,用低于0.5ml/min的低流速走柱,赶走气体。确定当脱气的溶剂从色谱柱进样口流出后,按流向箭头所示接柱。
4. 正确使用
柱子安装完成后,进行工作时要注意避免高压力和大流速,同时压力的快速变化也要避免。
二.保存说明
1.日常使用
如果柱子每天都使用,不需要将它从仪器上取下,流动相可在柱子中保留过夜。
2.短期保存
将色谱柱从仪器上取下,封紧保护螺帽。保存温度4-30度,不得低于4度。
3.长期保存
用水溶液或含0.05%的叠氮化钠缓冲液保存。保存温度4-30度,不得低于4度。不能受阳光直射。
三.溶剂
1. 替换溶剂
色谱柱中原厂保存的溶剂是0.1M的磷酸缓冲液含 0.05%的叠氮化钠和0.1M的硫酸钠。若流动相要改变,可用低于0.5ml/min 的流速走柱。若要用有机溶剂替换,先用蒸馏水过渡,再用有机溶剂走柱,注意浓度梯度,有机溶剂浓度的快速变化会使柱效降低。
2. PH范围
SW系列的溶剂PH范围在2.5-7.5。
3. 溶剂范围
SW系列所用的溶剂除了水溶液和缓冲液,还可以使用亲水性的有机溶剂,包括甲醇,乙腈以及它们的水溶液。
四.流速
推荐流速
SW色谱柱的推荐流速在0.5-1.0ml/min, 最大流速是1.2ml/min,柱子流速不能超过最大流速。